Resumo O impacto dos antibióticos no crescimento e na produção do casulo foi avaliado, além do isolamento e caracterização das bactérias associadas ao intestino de larvas infectadas do bicho-da-seda. A criação das larvas foi mantida nas condições recomendadas de temperatura e umidade. As larvas do bicho-da-seda com sintomas anormais foram coletadas do grupo controle e dissecadas para coleta do intestino. As bactérias foram isoladas do conteúdo intestinal por espalhamento em placas de ágar e incubadas a 37° C durante 48 horas. A identificação bacteriana e a análise filogenética foram realizadas pelo sequenciamento do gene 16S rRNA. As bactérias isoladas foram submetidas a teste de sensibilidade antimicrobiana (métodos de difusão em disco) com penicilina (10 µg / mL), tetraciclina (30 µg / mL), amoxicilina (25 µg / mL), ampicilina (10 µg / mL) e eritromicina (15 µg / mL). Todas as cepas isoladas apresentaram resultados positivos para o teste da catalase. Isolamos e identificamos cepas bacterianas (n = 06) do intestino de larvas de bicho-da-seda saudáveis e doentes. Com base na sequência do gene 16S rRNA, as bactérias isoladas mostraram estreita relação com Serratia, Bacillus e Pseudomonas spp. Notavelmente, 83,3% das cepas eram resistentes a penicilina, tetraciclina, amoxicilina, ampicilina e eritromicina, mas 16,6% mostraram suscetibilidade aos antibióticos comumente usados mencionados acima. As larvas do bicho-da-seda alimentadas com folhas tratadas com penicilina apresentaram melhora significativa no peso larval, comprimento larval e produção de casulo. Peso larval significativamente maior (6,88g), comprimento larval (5,84cm) e peso do casulo (1,33g) foram registrados para larvas alimentadas com folhas tratadas com penicilina, em comparação com outros antibióticos. Cepas bacterianas isoladas mostraram estreita relação com Serratia spp., Bacillus spp. e Pseudomonas spp.

Abstract The impact of antibiotics on growth, cocoon production was assessed in addition to isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut of infected larvae. Larval rearing was maintained at recommended conditions of temperature and humidity. Silkworm larvae showing abnormal symptoms were collected from the control group and dissected for gut collection. Bacteria were isolated from the gut content by spreading on agar plates and incubated at 37 °C for 48 hrs. Bacterial identification and phylogenetic analysis were carried out by 16S rRNA gene sequencing. The isolated bacteria were subjected to antimicrobial susceptibility test (disc diffusion methods) by using Penicillin (10 µg/mL), Tetracycline (30 µg/mL), Amoxicillin (25 µg/mL), Ampicillin (10 µg/mL), and Erythromycin (15 µg/mL). All isolated strains showed positive results for the catalase test. We isolated and identified bacterial strains (n = 06) from the gut of healthy and diseased silkworm larvae. Based on the 16S rRNA gene sequence, isolated bacteria showed close relation with Serratia, Bacillus, and Pseudomonas spp. Notably, 83.3% of strains were resistant to Penicillin, Tetracycline, Amoxicillin, Ampicillin, and Erythromycin but 16.6% showed antibiotic susceptibility to the above-mentioned commonly used antibiotics. Silkworm larvae fed on penicillin-treated leaves showed significant improvement in larval weight, larval length, and cocoon production. Significantly higher larval weight (6.88g), larval length (5.84cm), and cocoon weight (1.33g) were recorded for larvae fed on leaves treated with penicillin as compared to other antibiotics. Isolated bacterial strains showed close relation with Serratia spp., Bacillus spp. and Pseudomonas spp.

RESUMO: O feijão-preto [Vigna mungo (L.) Hepper] é uma importante cultura leguminosa cuja produção é severamente afetada pela podridão do carvão causada por Macrophomina phaseolina. Este estudo objetivou buscar uma alternativa ambientalmente acessível aos fungicidas sintéticos para o manejo dessa doença. A biomassa seca de uma planta alelopática (Sonchus oleraceous L.) foi usada para combater a ameaça. Solo de barro fumigado, pré-inoculado com M. phaseolina, foi alterado com diferentes doses de biomassa seca da planta daninha, que variaram de 0,5% a 3%. A aplicação de 2% de biomassa de plantas daninhas controlou completamente a doença. A inoculação do solo com M. phaseolina (controle positivo) reduziu o peso seco da parte aérea e o rendimento de grãos de feijão-preto em 59% e 91%, respectivamente, sobre o controle negativo. A aplicação de diferentes doses de alteração do solo no solo inoculado por patógenos aumentou o peso seco da parte aérea e o rendimento de grãos de feijão-preto em 107-307% e 438-7.400%, respectivamente, sobre controle positivo. O maior efeito positivo no crescimento e produtividade de feijão-preto no solo contaminado por M. phaseolina foi registrado devido a uma alteração de 2,5%. A inoculação com M. phaseolina aumentou significativamente as atividades de peroxidase (POX) e fenilalanina amônia liase (PAL). Entretanto, a aplicação de diferentes doses de biomassa de S. oleraceous ao solo diminuiu gradualmente a atividade dessas enzimas. O presente estudo concluiu que a aplicação de 2,5% de biomassa seca de S. oleraceous pode controlar completamente a podridão de carvão em feijão-preto e aumentar significativamente o crescimento e o rendimento da cultura.

ABSTRACT: Urdbean [Vigna mungo (L.) Hepper] is an important leguminous crop whose production is severely affected by charcoal rot disease caused by Macrophomina phaseolina. This study was undertaken to seek an environmental friendly alternative to synthetic fungicides for management of this disease. Dry biomass of an allelopathic weed Sonchus oleraceous L. was used to combat the menace. Fumigated sandy loam pot soil, pre-inoculated with M. phaseolina, was amended with different doses of dry biomass of the weed ranging from 0.5% to 3%. Application of 2% weed biomass completely controlled the disease. Soil inoculation with M. phaseolina inoculation (positive control) reduced shoot dry weight and grain yield of urdbean by 59% and 91%, respectively, over negative control. Application of different doses of soil amendment in pathogen inoculated soil enhanced shoot dry weight and grain yield of urdbean by 107-307% and 438-7400%, respectively, over positive control. The highest positive effect on growth and yield of uedbean in M. phaseolina contaminated soil was recorded due to 2.5% amendment. M. phaseolina inoculation significantly enhanced peroxidase (POX) and phenyl alanine ammonia lyase (PAL) activities. However, application of different doses of S. oleraceous biomass to the soil gradually decreased activities of these enzymes. The present study concludes that application of 2.5% dry biomass of S. oleraceous can completely control charcoal rot of urdbean and significantly enhance crop growth and yield.

RESUMO: O presente estudo foi realizado para verificar o potencial antifúngico do extrato de caule de Sisymbrium irio L. contra Fusarium oxysporum f. sp. cepae (FOC). Em bioensaios preliminares, diferentes concentrações (1% a 5%) de extratos de folhas, caules e frutos foram avaliadas contra o FOC. Todos os extratos foram eficazes contra o patógeno. No entanto, o extrato de folhas foi o mais eficaz, causando 25-41% de redução na biomassa FOC. O fracionamento do extrato metanólico das folhas foi feito por dois solventes orgânicos: n-hexano e clorofórmio. Diferentes concentrações (1,56 a 200 mg mL-1) dessas frações foram testadas contra o FOC. As frações de n-hexano e clorofórmio mostraram atividade inibitória contra o patógeno e resultaram em redução de 77-93% e 80-96% na biomassa de FOC, respectivamente. A análise por CG-EM mostrou a presença de 24 compostos em n-hexano e 4 compostos em fração clorofórmica. Na fração n-hexano, o β-sitosterol (18,64%) foi o composto mais abundante, seguido pelo ácido orótico, éster bis (terc-butildimetilsilil) terc-butildimetilsilílico (12,18%), éster de ácido 10-octadecenoico metil (7,90%) e Ter de di-isoctilo do ido 1,2-benzenodicarboxico (6,05%). Os principais compostos identificados na fração clorofórmica foram o ácido 1,3-benzenodicarboxílico, o éster bis (2-etil-hexílico) (50,82%) e o ftalato di-n-octilo (33,00%). Este estudo conclui que as frações de n-hexano e clorofórmio do extrato metanólico das folhas de S. irio contêm potentes constituintes antifúngicos para o manejo do FOC.

ABSTRACT: The present study was carried out to check the antifungal potential of Sisymbrium irio L. shoot extract against Fusarium oxysporum f. sp. cepae (FOC). In preliminary bioassays, different concentrations (1 to 5%) of leaf, stem and fruit extracts were evaluated against FOC. All the extracts were effective against the pathogen. However, the leaf extract was found the most effective causing 25-41% decrease in FOC biomass. The fractionation of methanolic leaf extract was done by two organic solvents namely n-hexane and chloroform. Different concentrations (1.56 to 200 mg mL-1) of these fractions were tested against FOC. The n-hexane and chloroform fractions showed inhibitory activity against the pathogen and resulted in 77-93% and 80-96% reduction in biomass of FOC, respectively. GC-MS analysis showed the presence of 24 compounds in n-hexane and 4 compounds in chloroform fraction. In n-hexane fraction, β-sitosterol (18.64%) was the most abundant compound followed by orotic acid, bis(tert-butyldimethylsilyl)-, tert-butyldimethylsilyl ester (12.18%), 10-octadecenoic acid, methyl ester (7.90%) and 1,2-benzenedicarboxylic acid, diisooctyl ester (6.05%). Major compounds identified in chloroform fraction were 1,3-benzenedicarboxylic acid, bis(2-ethylhexyl) ester (50.82%) and di-n-octyl phthalate (33.00%). This study concludes that n-hexane and chloroform fractions of methanolic leaf extract of S. irio contain potent antifungal constituents for the management of FOC.

RESUMO: O presente estudo foi realizado para avaliar a atividade antifúngica e a análise por CG-EM do extrato de folhas de Chenopodium murale contra Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (FOL), um patógeno de tomate altamente problemático no solo. Folhas secas de C. murale foram extraídas com metanol por duas semanas e, após a evaporação do solvente em evaporador rotatório, foi realizado um bioensaio antifúngico contra a FOL. Todas as concentrações (1% a 5%) reduziram significativamente a biomassa de FOL em 14-45%. O restante do extrato metanólico foi fracionado com n-hexano, clorofórmio e acetato de etila, e todas essas frações foram analisadas quanto ao seu potencial antifúngico. Uma concentração de 200 mg mL-1 de várias subfrações reduziu significativamente a biomassa fúngica em 94-98%, em relação ao controle. Todas as subfrações foram submetidas à análise por GC-MS, que revelou a presença de 32 compostos em n-hexano, 2 compostos em clorofórmio e 13 compostos em subfração de acetato de etila. Os compostos predominantes na subfração n-hexano foram ácido hexadecanoico, metil éster (14,64%), metil linolenato (16,61%) e g-sitosterol (13,53%). Na subfração de clorofórmio, o bis (2-etil-hexil) ftalato (92,31%) e, na subfração etil-acetato, etilbutirato (19,57%), di-hexil ftalato (11,19%) e dioctilftalato (12,16%) estavam presentes em maior concentração.

ABSTRACT: The present study was performed to evaluate antifungal activity and GC-MS analysis of leaf extract of Chenopodium mural against Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (FOL), a highly problematic soil-borne pathogen of tomato. Dried leaves of C. murale were extracted with methanol for 2 weeks and after evaporating the solvent on a rotary evaporator, antifungal bioassay was carried out against FOL. All concentrations (1 to 5%) significantly reduced FOL biomass by 14-45%. The remaining methanolic extract was fractioned with n-hexane, chloroform and ethyl acetate and all these fractions were assayed for their antifungal potential. A 200 mg mL-1 concentration of various sub-fractions reduced fungal biomass significantly by 94-98% over control. All the sub-fractions were subjected to GC-MS analysis that revealed presence of 32 compounds in n-hexane, 2 compounds in chloroform and 13 compounds in ethyl acetate sub-fraction. The predominant compounds in n-hexane sub-fraction were hexadecanoic acid, methyl ester (14.64%), methyl linolenate (16.61%) and g-sitosterol (13.53%). In chloroform sub-fraction, bis (2-ethylhexyl) phthalate (92.31% and in ethyl-acetate sub-fraction, ethyl butyrate (19.57%), dihexyl phthalate (11.19%) and dioctyl phthalate (12.16%) were present in higher concentration.

RESUMO: A cebola é atacada por um patógeno fúngico no solo, Fusarium oxysporum, que resulta na doença da podridão basal. No presente estudo, três espécies de Trichoderma (T. pseudokoningii, T. harzianum e T. reesei) e as folhas da planta daninha solanácea Withania somnifera foram utilizadas para o manejo dessa doença. O estudo de interação in vitro revelou que T. harzianum é o agente de biocontrole mais eficaz contra o patógeno. Em um ensaio em vaso, misturou-se material de folha seca de W. somnifera (1%, 2% e 3% p/p) e o inóculo de T. harzianum no substrato já inoculado com o patógeno. A maior incidência da doença (87%) foi observada em controle positivo (inoculação de patógenos sem qualquer alteração). Diferentes doses do material da folha seca reduziram a incidência da doença para 41-66%. Em combinação com o material foliar, T. harzianum reduziu a incidência da doença para 20-53%. Em um bioensaio laboratorial, foi preparado um extrato de folhas secas de W. somnifera em metanol e particionado com n-hexano, clorofórmio, acetato de etilo e n-butanol. A concentração mais elevada (200 mg mL-1) de todas as frações, exceto a de n-butanol, diminuiu significativamente a biomassa fúngica em relação ao controle. Este estudo conclui que a podridão basal da cebola pode ser controlada pela aplicação combinada de material de folha seca de W. somnifera e o agente de controle biológico T. harzianum.

ABSTRACT: Onion is attacked by destructive soil-borne fungal plant pathogen Fusarium oxysporum f. sp. cepae, resulting in basal rot disease. In the present study, three Trichoderma species (T. pseudokoningii, T. harzianum and T. reesei) and leaves of solanaceous weed Withania somnifera were used for management of this disease. The in vitro interaction study revealed T. harzianum as the most effective biocontrol agent against the pathogen. In a pot trial, dried leaf material of W. somnifera (1%, 2% and 3% w/w) and inoculum of T. harzianum were mixed in the pot soil previously inoculated with the pathogen. The highest incidence of the disease (87%) was found in positive control (pathogen inoculation without any amendment). Different rates of dry leaf material reduced the incidence of the disease to 41-66%. T. harzianum in combination with leaf material reduced the incidence of the disease to 20-53%. In a laboratory bioassay, the dry leaf extract of W. somnifera was prepared in methanol and partitioned with n-hexane, chloroform, ethyl acetate and n-butanol. The highest concentration (200 mg mL-1) of all except for the n-butanol fraction significantly decreased fungal biomass over control. This study concludes that basal rot of onion can be controlled by combined application of W. somnifera dry leaf material and biological control agent T. harzianum.

RESUMO: Um experimento em vaso foi realizado para verificar o efeito da aplicação da biomassa seca de Coronopus didymus (L.) Sm. (1%, 2% e 3% p/p) e duas espécies de Trichoderma (T. viride e T. aureoviride) sobre o crescimento e a fisiologia do feijão-mungo [Vigna radiata (L.) WIlczek] sob estresse biótico causado pelo fungo Macrophomina phaseolina (Tassi) Goid. A inoculação de M. phaseolina (controle positivo) reduziu a sobrevivência das plantas, o comprimento da parte aérea e da raiz e a biomassa seca das plantas em 22%, 52%, 61% e 64%, respectivamente, em relação ao controle negativo (sem qualquer alteração). Foram observados 100% de sobrevivência das plantas nos tratamentos com T. aureoviride isoladamente ou em combinação com 1% e 2% da biomassa de C. didymus. Da mesma forma, T. viride em combinação com 2% de biomassa também resultou em 100% de sobrevivência das plantas. A aplicação de 3% de biomassa de C. didymus teve efeito acentuado no crescimento da cultura, resultando em aumento de 101%, 233% e 342% no comprimento da parte aérea, comprimento da raiz e biomassa da planta, respectivamente, em relação ao controle positivo. A inoculação isolada de uma das duas espécies de Trichoderma spp. melhorou de forma significativa vários parâmetros de crescimento das plantas, em comparação ao controle positivo. Em geral, em combinação com 2% de biomassa de C. didymus, ambas as espécies de Trichoderma spp. provaram ser a escolha mais apropriada para melhorar a biomassa de feijão-mungo sob estresse causado por M. phaseolina. A atividade das enzimas relacionadas à defesa da planta, ou seja, peroxidase (PO), polifenol oxidase (PPO) e fenilalanina amônia liase (PAL), foi geralmente maior nos tratamentos em que 1% da biomassa de C. didymus foi aplicada isoladamente ou combinada com Trichoderma spp. em solo inoculado com M. phaseolina.

ABSTRACT: A pot experiment was carried out to check the effect of Coronopus didymus (L.) Sm. dry biomass application (1%, 2% and 3% w/w) and two species of Trichoderma (T. viride and T. aureoviride) on growth and physiology of mungbean [Vigna radiata (L.) WIlczek] under biotic stress of Macrophomina phaseolina (Tassi) Goid. Inoculation of M. phaseolina (positive control) reduced plant survival, shoot and root length as well as plant dry biomass by 22%, 52%, 61% and 64%, respectively, over the negative control (without any amendment). There was 100% plant survival in treatments with T. aureoviride alone or in combination with 1% and 2% C. didymus biomass. Likewise, T. viride in combination with 2% biomass also showed 100% plant survival. Application of 3% C. didymus biomass had a pronounced effect on crop growth resulting in 101%, 233% and 342% increase in shoot length, root length and plant biomass, respectively, over the positive control. Sole inoculation of either of the two Trichoderma spp. significantly enhanced various plant growth parameters over the positive control. In general, in combination with 2% biomass of C. didymus, both Trichodermaspp. proved to be the best choice for improving mungbean biomass under stress of M. phaseolina. Activity of denfense related enzymes viz. peroxidase (PO), polyphenol oxidase (PPO) and phenylalanine ammonia lyase (PAL) was generally higher in treatments in which 1% C. didymus biomass was applied either alone or combined with Trichoderma spp. in M. phaseolina inoculated soil.

RESUMO: Foi realizada uma avaliação do potencial antifúngico da parte aérea da gramínea alelopática Cenchrus pennisetiformis (Hochst. & Steud.) Wipff. contra Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici Snyder & Hansen, um patógeno fúngico que causa a doença de murcha no tomate (Solanum lycopersicum L.). Diferentes concentrações (1% a 6%) do extrato metanólico da folha, do caule e da inflorescência da gramínea reduziram significativamente a biomassa fúngica em 40-88%, 13-89% e 26-76%, respectivamente. O extrato metanólico (folha + caule) foi fracionado, utilizando-se quatro solventes orgânicos: n-hexano, clorofórmio, acetato de etila e n-butanol. Todas as subfrações de extrato metanólico da parte aérea apresentaram significativo potencial antifúngico em graus variáveis. Concentrações diferentes (1,56-200 mg mL-1) da subfração do acetato de etila exibiram a melhor atividade antifúngica, com supressão de 49-100% na biomassa fúngica. A análise CG-EM da subfração do acetato de etila revelou a presença de 10 compostos. O principal composto (30,99%) foi o fenol, 2,4-bis{1,1-dimetiletil}, seguido de ácido hexadecanoico, éster etílico (21,72%), 2,3-di-hidrobenzofurano (10,65%), 1-propanol-2-2-hidroxipropil (10,60%) e 1-eicoseno (8,32%).

ABSTRACT: Antifungal potential of aerial parts of an allelopathic grass Cenchrus pennisetiformis (Hochst. & Steud.) Wipff. was evaluated against Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici Snyder & Hansen, a fungal pathogen causing wilt disease in tomato (Solanum lycopersicum L.). Different concentrations (1% to 6%) of methanolic leaf, stem and inflorescence extract of the grass significantly reduced fungal biomass by 40-88%, 13-89%, and 26-76%, respectively. Methanolic shoot (leaf + stem) extract was fractionated using four organic solvents viz. n-hexane, chloroform, ethyl acetate and n-butanol. All the sub-fractions of methanolic shoot extract showed remarkable antifungal potential to variable extents. Different concentrations (1.56-200 mg mL-1) of ethyl acetate sub-fraction exhibited the best antifungal activity resulting in 49-100% suppression in the fungal biomass. GC-MS analysis of ethyl acetate sub-fraction showed the presence of 10 compounds. Phenol, 2,4-bis{1,1-dimethlethyl}- was the major compound (30.99%) followed by hexadecanoic acid, ethyl-ester (21.72%), benzofuran 2,3-dihydro (10.65%), 1-propanol-2-2-hydroxypropxy (10.60%) and 1-eicosene (8.32%).

RESUMO: Os metabólitos de Aspergillus niger, preparados em caldo de extrato de malte (ME) e caldo de dextrose de batata (PD), foram avaliados quanto à sua atividade herbicida contra uma erva partênica nociva (Parthenium hysterophorus). Em resenhas de laboratório, metabólitos fúngicos originais (X) e diluídos (½ X) reduziram substancialmente a germinação e o crescimento de plântulas da planta daninha. No entanto, os metabólitos preparados em caldo de ME demonstraram ser superiores na sua atividade herbicida, comparados aos metabólitos preparados em outro meio de crescimento. Os metabólitos originais preparados em caldo ME estagnaram completamente a germinação de sementes de erva partênica, ao passo que os preparados em caldo PD reduziram a germinação em 89%, em relação ao controle. Nos ensaios em vaso, as mudas de erva partênica de uma semana, duas semanas e três semanas foram pulverizadas três vezes com metabólitos originais e concentrados (2X) de A. niger preparados em caldo ME. As plantas foram colhidas após 40 dias de semeadura. As plantas com uma semana de tratamento foram mais suscetíveis à pulverização de fungos metabólitos, seguidas das plantas de duas semanas e de três semanas. Os metabólitos originais e concentrados reduziram significativamente a biomassa de brotos de plantas de uma semana de idade em 57% e 68%, e a biomassa de raízes, em 50% e 75%, respectivamente. O presente estudo conclui que os metabólitos de A. niger preparados em caldo ME podem efetivamente controlar a germinação e o crescimento de ervas partênicas.

ABSTRACT: Metabolites of Aspergillus niger, prepared in malt extract (ME) broth and potato dextrose (PD) broth, were evaluated for their herbicidal activity against a noxious parthenium weed (Parthenium hysterophorus). In laboratory assays, original (X) and diluted (½ X) fungal metabolites significantly reduced germination and seedling growth of weed. However, metabolites prepared in ME broth proved to have greater herbicidal activity than metabolites prepared in other growth medium. Original metabolites prepared in ME broth have completely hinder the germination of parthenium seeds; while those prepared in PD broth have reduced germination by 89% over control. In pot trials, one-week, two-week and three-week-old parthenium seedlings were sprayed three times with original and concentrated (2X) metabolites of A. niger prepared in ME broth. Plants were harvested after 40 days of sowing. One-week treatment plants were most susceptible to fungal metabolites spray, followed by two-week and three-week treatment plants, respectively. Original and concentrated metabolites have significantly reduced shoot biomass of one-week-old plants by 57% and 68%, and root biomass by 50% and 75%, respectively. The present study has come to the conclusion that A. niger metabolites prepared in ME broth can effectively control germination and growth of parthenium.

RESUMO Foram extraídos em metanol, por duas semanas, as folhas, caules, raízes e inflorescência de uma planta daninha da família Asteraceae, a Circium arvense. A evaporação do metanol se fez com o auxílio de um evaporador rotativo. Foram preparadas diferentes concentrações (1, 2, 3, 4 e 5%) de extratos de metanol, e suas atividades antifúngicas contra o Macrophomina phaseolina foram analisadas através da utilização de caldo extrato de malte como ambiente de crescimento. De forma geral, ocorreram graus variáveis de atividades antifúngicas nos extratos de todas as partes da planta. A atividade antifúngica mais significativa ocorreu ao extrato de metanol das folhas, seguido dos extratos do caule e da raiz, com redução de 10-74%, 6-57% e 11-39% de biomassa fúngica em relação ao grupo controle, respectivamente. No extrato de inflorescência ocorreu a menor atividade antifúngica, resultando em redução de 2-30% de biomassa fúngica em relação ao controle. Houve uma relação inversamente proporcional entre concentração de extrato e biomassa fúngica para todas as quatro partes de extratos. O método GC-MS de análise revelou 10 compostos no extrato de metanol da folha, que foi mais eficaz. Dentre estes, o ácido 10-octadecanóico, éster de metilo (26,442%), 2H-1-benzopirano, 6,7-dimetoxi-2-2-dimetil (20,195%), ácido hexadecanóico, éster de metilo (15,752%) e ácido 9-12-octadecadienóico (Z,Z)-, éster de metilo (12,628%) predominaram no extrato que pode ter sido responsável pela atividade antifúngica. Este estudo conclui que extratos de metanol de folhas de C. arvense podem ser utilizados para controlar o M. phaseolina.

ABSTRACT Leaves, stems, roots and inflorescence of the asteraceous weed Circium arvense were extracted in methanol for two weeks. Methanol was evaporated in a rotary evaporator. Different concentrations (1, 2, 3, 4 and 5%) of methanolic extracts were prepared, and their antifungal activities were studied against Macrophomina phaseolina, using malt extract broth as growth medium. In general, extracts of all plant parts showed antifungal activities to variable extents. The highest antifungal activity occurred due to methanolic extract of leaves, followed by stem and root extracts, resulting in 10-74%, 6-57% and 11-39% reduction in fungal biomass over control, respectively. Inflorescence extract showed the least antifungal activity, resulting in 2-30% reduction in fungal biomass over control. There was a linear and inverse relationship between extract concentrations and fungal biomass for extracts of all the four parts. GC-MS analysis showed that there were 10 compounds in most effective methanolic leaf extract. Among these, 10-octadecanoic acid, methyl ester (26.442%), 2H-1-benzopyran, 6,7-dimethoxy-2-2-dimethyl (20.195%), hexadecanoic acid, methyl ester (15.752%) and 9,12-octadecadienoic acid (Z,Z)-, methyl ester (12.628%) were predominant compounds in the extract that may be responsible for antifungal activity. This study concludes that methanolic leaf extracts of C. arvense can be used for the management of M. phaseolina.

RESUMO A losna-branca (Parthenium hysterophorus) é uma espécie invasora não nativa que infesta várias partes do mundo, incluindo o Paquistão. Diversos herbicidas têm sido recomendados para o controle dessa planta daninha, mas eles apresentam riscos à saúde humana e à segurança ambiental. Neste estudo, o potencial herbicida de filtrados de cultura da espécie fúngica Alternaria japonica foi avaliado em comparação à planta daninha losna-branca. A espécie fúngica foi cultivada em caldo de extrato de malte (CEM) e caldo de dextrose de batata (CDB) por 15 dias. Os filtrados das culturas foram obtidos pela passagem dos materiais através de um pano de musselina, seguido por filtração em papel-filtro e, em seguida, em papel-filtro Millipore. Nos bioensaios em laboratório, foi observado o efeito dos filtrados original (X) e diluído (1/2X) na germinação de sementes, bem como o crescimento do sistema radicular e da parte aérea da losna-branca. Em geral, os filtrados da cultura fúngica preparados em qualquer um dos meios de cultura gerou redução significativa na germinação e no crescimento das mudas de losna-branca. No entanto, os filtrados da cultura preparados em caldo de dextrose de batata apresentaram maior atividade herbicida do que os preparados em caldo de extrato de malte. Foram realizados bioensaios foliares por pulverização usando filtrados de cultura de A. japonica preparados em caldo de dextrose de batata. Neste experimento, mudas de losna-branca com uma, duas e três semanas de idade foram pulverizadas quatro vezes com os filtrados inicial (X) e concentrado (2x) da cultura fúngica, com intervalos de quatro dias. Em geral, as mudas de losna-branca com uma semana de idade mostraram alta sensibilidade à aspersão foliar de metabólitos fúngicos. O presente estudo concluiu que os filtrados de cultura de A. japonica preparados em caldo de dextrose de batata contêm componentes herbicidas potentes para o manejo da losna-branca.

ABSTRACT Parthenium (Parthenium hysterophorus) is an alien invasive weed infesting many parts of the world including Pakistan. A number of herbicides have been recommended for control of this weed, but these herbicides have issues regarding human health and environmental safety. In the current study, the herbicidal potential of culture filtrates of a fungal species, namely Alternaria japonica, was evaluated against parthenium weed. The fungal species was grown in malt extract broth (MEB) and potato dextrose broth (PDB) for 15 days. Culture filtrates were obtained by passing the materials through muslin cloth followed by filtration through filter paper and then through Millipore filter paper. In laboratory bioassays, the effect of original (X) and diluted (1/2X) filtrates was studied on seed germination, and shoot and root growth of parthenium. In general, fungal culture filtrates prepared in either of the two growth medium significantly reduced germination and seedling growth of parthenium. However, culture filtrates prepared in potato dextrose broth showed greater herbicidal activity than those prepared in malt extract broth. Foliar spray bioassays were carried out by using culture filtrates of A. japonica prepared in potato dextrose broth. In this experiment, 1-, 2- and 3 week old parthenium seedlings were sprayed 4 times with original (X) and concentrated (2X) fungal culture filtrates, with intervals of 4 days. In general, 1 week old parthenium seedlings were highly susceptible to foliar spray of fungal metabolites. The present study concludes that culture filtrates of A. japonica prepared in potato dextrose broth contain potent herbicidal constituents for management of parthenium.

RESUMO Macrophomina phaseolina é um dos mais destrutivos agentes patogênicos fúngicos de plantas com origem no solo. No presente estudo, as diferentes partes aéreas de Senna occidentalis foram analisadas em relação à atividade antifúngica contra M. phaseolina. Em bioensaios iniciais de triagem, concentrações de 0,5 a 3,0% dos extratos metanólicos de frutas, folhas e caule foram testadas contra M. phaseolina. O extrato metanólico das folhas mostrou a maior atividade, causando supressão de 29% na produção de biomassa de M. phaseolina. O fracionamento do extrato das folhas de S. occidentalis foi realizado com quatro solventes orgânicos. Os bioensaios com diversas concentrações (2,34 a 150 mg mL-1) dessas subfrações revelaram que a subfração de clorofórmio foi a mais eficaz, causando redução de 93-98% na biomassa de M. phaseolina, seguida da supressão de 59-92% na biomassa fúngica devido à subfração de n-hexano. As subfrações de acetato de etila e n-butanol foram eficazes apenas nas concentrações mais elevadas. A análise por GC-MS da subfração de clorofórmio foi feita para identificar compostos diferentes. Seis compostos foram identificados nesta fração; 1,3-benzenodicarboxílico, bis (2-etilhexil) éster foi o composto predominante (53,55%), seguido por 9,10-dimetil triciclo [4.2.1.1 (2,5)] decano-9,10-diol (22,68%), cicloexanol, e 2-(2-hidroxi-2-propil)-5-metil (9,87%).

ABSTRACT Macrophomina phaseolina is one of the most destructive soil-borne fungal plant pathogens. In the present study, different aerial parts of Senna occidentalis were analyzed for their antifungal activity against M. phaseolina. In initial screening bioassays, 0.5-3.0% concentrations of methanolic extracts of fruit, leaf and stem were tested against M. phaseolina. The methanolic leaf extract showed the greatest activity causing up to 29% suppression in biomass production of M. phaseolina. Fractionation of leaf extract of S. occidentalis was carried out with four organic solvents. Bioassays with a range of concentrations (2.34-150 mg mL-1) of these sub-fractions revealed that the chloroform sub-fraction was the most effective, causing 93-98% reduction in the biomass of M. phaseolina, followed by 59-92% suppression in fungal biomass due to the n-hexane sub-fraction. The ethyl acetate and n-butanol sub-fractions were only effective at higher concentrations. GC-MS analysis of chloroform sub-fraction was performed to identify different compounds. Six compounds were identified in this fraction; 1,3-benzenedicarboxylic acid, bis(2-ethylhexyl) ester was the predominant compound (53.55%) followed by 9,10-dimethyltricyclo[4.2.1.1 (2,5)]decane-9,10-diol (22.68%), cyclohexanol, and 2-(2-hydroxy-2-propyl)-5-methyl (9.87%).

RESUMO A mangueira (Mangifera indica) é uma das árvores mais importantes do mundo, cultivadas principalmente nos países tropicais e subtropicais. A antracnose, causada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides , é a doença mais prejudicial, que causa a redução do número de flores e perdas de rendimento da manga. O presente estudo foi desenvolvido para avaliar a atividade antifúngica de extratos de Datura metel contra C. gloeosporioides. Extratos (1% a 3%) de diferentes partes de D. metel viz. folhas, sementes e raízes foram avaliados quanto ao potencial antifúngico. O extrato metanólico de sementes de D. metel apresentou o maior potencial antifúngico contra o fungo de teste. Todas as concentrações aplicadas reduziram com eficácia o crescimento do fungo de teste. No entanto, o extrato metanólico de sementes na concentração de 1,5% apresentou redução máxima (80%) em relação ao controle. Este extrato foi ainda submetido a fraccionamento utilizando vários solventes orgânicos viz. n-hexano, clorofórmio, acetato de etila e n-butanol. A fração de clorofórmio mostrou ser a melhor para a inibição do fungo-alvo, após análise por meio de GC-MS, e foram identificados vários constituintes bioativos, por exemplo, ácido n-hexadecanóico, fitol, ácido octadecanóico, ácido oleico, o-xileno e ciclo hexanol.

ABSTRACT Mango (Mangifera indica) is one of the most important trees grown mainly in the tropical and subtropical countries. Anthracnose disease caused by Colletotrichum gloeosporioides, is the most damaging disease causing reduction of flower set and yield losses in mango. The present study was designed to evaluate antifungal activity of Datura metel extracts against C. gloeosporioides. Extracts (1% to 3%) of different parts of D. metel viz. leaves, seeds and roots were assessed for their antifungal potential. Methanolic seed extract of D. metel depicted the highest antifungal potential against the test fungus. All the applied concentrations effectively reduced growth of the test fungus. However, 1.5% conc. of methanolic seeds extract showed maximum reduction (80%) in comparison with control. This extract was further subjected to fractionation using various organic solvents viz. n-hexane, chloroform, ethyl acetate and n-butanol. Chloroform fraction was proved to be the best for the inhibition of the target fungus that was analyzed by GC-MS and various bioactive constituents like n-hexadecanoic acid, phytol, octadecanoic acid, oleic acid, o-xylene and cyclohexanol were identified.

RESUMO Sclerotium rolfsii é um patógeno vegetal fungoso do solo que causa doenças em mais de 500 espécies de plantas. Os fungicidas químicos utilizados para controlar essa doença causam poluição ambiental. Portanto, compostos derivados de plantas podem ser usados como alternativa aos fungicidas sintéticos para reduzir a poluição ambiental. Chenopodium album é uma planta daninha da família Chenopodiaceae que é utilizada como alimento e também tem importância medicinal. No presente estudo, a atividade antifúngica do extrato metanólico de raiz C. album foi avaliada diante de S. rolfsii utilizando seis concentrações, ou seja, 0,5, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5 e 3,0 g 100 mL-1, alteradas em extrato de malte como meio de crescimento. Todas as concentrações de extrato de raiz reduziram significativamente a biomassa fúngica em 15-58% em relação ao controle. Foi feita a análise por cromatografia gasosa com espectrômetro de massa (GCMS) do extrato metanólico de raiz de C. album. Seis compostos foram identificados em extrato metanólico de raiz por meio de análise por GC-MS. O composto mais abundante foi o ácido 1,2-benzenodicarboxílico, mono (2-etil-hexil) éster (58,56%), seguido de ácido 9-octadecenoico (Z)-, éster metílico (12,75%), e ácido 9-octadecenoico (Z)-, éster metílico (10,27%), o que pode ser responsável pela atividade antifúngica de extrato metanólico de raiz de C. album.

ABSTRACT Sclerotium rolfsii is a soil-borne fungal plant pathogen that causes diseases in more than 500 plant species. Chemical fungicides used to control this disease cause environmental pollution, therefore, plant derived compounds can be used as alternative to synthetic fungicides to reduce environmental pollution. Chenopodium album is a weed of family Chenopodiaceae that is used as food and also has medicinal importance. In the present study, antifungal activity of methanolic root extract of C. album was evaluated against S. rolfsii using six concentrations viz. 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 and 3.0 g 100 mL-1 amended in malt extract as growth medium. All the root extract concentrations significantly reduced fungal biomass by 15-58% over control. Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) analysis of the methanolic root extract of C. album was performed. Six compounds were identified in methanolic root extract through GC-MS analysis. The most abundant compound was 1,2-benzenedicarboxylic acid, mono(2-ethylhexyl) ester (58.56%) followed by 9-octadecenoic acid (Z)-, methyl ester (12.75%) and 9-octadecenoic acid (Z)-, methyl ester (10.27%), which might be responsible for antifungal activity of methanolic root extract of C. album.

RESUMO Macrophomina phaseolina, um patógeno vegetal do solo, tem a capacidade de causar doenças em cerca de 500 espécies de plantas. Infelizmente, até agora nenhum fungicida registrado foi disponibilizado contra esse patógeno fúngico. No presente estudo, diferentes extratos de Sisymbrium irio, uma planta daninha da família Brassicácea, foram testados para avaliação de sua atividade antifúngica contra M. phaseolina. Em bioensaios de triagem, a atividade antifúngica de extratos metanólicos de concentrações de 1% a 6% de diferentes partes (folha, caule, raiz e fruta) da planta daninha foi avaliada contra o patógeno fúngico. Os extratos metanólicos de folhas e raízes reduziram significativamente a biomassa fúngica em até 59% e 69% acima do controle, respectivamente. Os extratos metanólicos de folha e de raiz foram divididos utilizando quatro solventes orgânicos: n-hexano, clorofórmio, acetato de etilo e n-butanol, em ordem de polaridade crescente. A atividade antifúngica de diferentes concentrações dessas frações (3,125, 6,25, …, 200 mg mL-1) foi avaliada contra o patógeno. As frações de clorofórmio e n hexano do extrato metanólico de folha mostraram uma atividade altamente pronunciada, resultando em 35-75% e 15-87% de redução da biomassa fúngica em relação aos tratamentos de controle correspondentes, respectivamente. Da mesma forma, a maior concentração (200 mg mL-1) de frações de clorofórmio, acetato de etilo e n-butanol de extrato metanólico de raiz reduziu a biomassa fúngica em 75%, 70% e 87%, respectivamente. O presente estudo conclui que as frações de clorofórmio e n-butanol de extratos metanólicos de folhas e raízes de S. irio, respectivamente, contêm potentes componentes antifúngicos para o manejo de M. phaseolina.

ABSTRACT Macrophomina phaseolina, a soil-borne plant pathogen, has the ability to cause diseases in about 500 plant species. Unfortunately, so far no registered fungicide is available against this fungal pathogen. In the present study, different extracts of Sisymbrium irio, a weed of family Brassicaceae, were tested for evaluation of their antifungal activity against M. phaseolina. In screening bioassays, antifungal activity of methanolic extracts of 1% to 6% concentrations of different parts (leaf, stem, root and fruit) of the weed was assessed against the fungal pathogen. Methanolic leaf and root extracts significantly reduced fungal biomass up to 59% and 69% over control, respectively. Methanolic leaf and root extracts were further partitioned using four organic solvents namely n-hexane, chloroform, ethyl acetate and n-butanol in order of increasing polarity. Antifungal activity of different concentrations of these fractions (3.125, 6.25, …, 200 mg mL-1) was assessed against the pathogen. Chloroform and n-hexane fractions of methanolic leaf extract showed highly pronounced activity resulting in 35-75% and 15-87% reduction in fungal biomass over corresponding control treatments, respectively. Likewise, the highest concentration (200 mg mL-1) of chloroform, ethyl acetate and n-butanol fractions of methanolic root extract reduced fungal biomass by 75%, 70% and 87%, respectively. The present study concludes that chloroform and n-butanol fractions of methanolic leaf and root extracts of S. irio, respectively, contain potent antifungal constituents for management of M. phaseolina.

RESUMO Biopower é um biofertilizante comercial para arroz composto de vários fixadores de nitrogênio associativos. Neste estudo, realizou-se um ensaio de campo para avaliar o efeito da aplicação de Biopower no crescimento de algumas plantas daninhas de arroz e na produção de arroz (Oryza sativa). Foram semeadas quatro espécies de plantas daninhas comuns: Cyperus rotundus, Echinochloa colonum, Marsilea minuta e Paspalum paspaloides; plantas daninhas variadas foram semeadas na proporção de 1:1 em solo ajustado com i) meia dose de N (nitrogênio) + doses recomendadas de adubos PK (fósforo, potássio), ii) doses recomendadas de adubos NPK e iii) estrume de quintal + fertilizantes NPK, com e sem aplicação de Biopower. A aplicação desse biofertilizante reduziu de forma variável a biomassa de plantas daninhas em diferentes sistemas de ajuste do solo. O efeito do Biopower na biomassa de plantas daninhas foi maior em NPK, seguido por ajuste de FYM (esterco da fazenda), resultando em redução de até 50% e 36% na biomassa de plantas daninhas, respectivamente. A aplicação do Biopower aumentou o teor de N no arroz em todos os tratamentos. O efeito da aplicação do biofertilizante no teor de N da parte aérea foi mais acentuado em ½N-PK e menor nas parcelas onde houve aplicação de NPK. As quatro plantas daninhas plantadas com arroz reduziram o rendimento de grãos de arroz em 12-75%, em diferentes ajustes do solo. A aplicação de Biopower aumentou o rendimento de grãos de arroz no controle, livre de plantas daninhas, e em diferentes parcelas infestadas por plantas daninhas em 38-90% em ½N-PK, 6-13% em NPK e 12-150% em parcelas com FYM. O presente estudo concluiu que o efeito adverso das plantas daninhas na produção de grãos de arroz pode ser combatido com a aplicação de Biopower juntamente com ajustes de ½N-PK ou de FYM.

ABSTRACT Biopower is a commercial rice biofertilizer comprised of various associative nitrogen fixers. In this present study, a field trial was carried out to assess the effects of Biopower application on the growth of some rice weeds and yield of rice (Oryza sativa). Four common rice weeds namely Cyperus rotundus, Echinochloa colonum, Marsilea minuta, Paspalum paspaloides, and mixed weeds were sown in 1:1 weed crop ratio in soil amended with i) ½ dose of N (nitrogen) + recommended doses of PK (phosphorus, potassium) fertilizers, ii) recommended doses of NPK fertilizers, and iii) farmyard manure (FYM) + ¼NPK fertilizers, with and without Biopower application. Biopower application variably reduced weed biomass in different soil amendment systems. The effect of Biopower on weed biomass was most pronounced in NPK, followed by FYM amendment, resulting in up to 50% and 36% reduction in weed biomass, respectively. Biopower application enhanced shoot N content of rice in all the treatments. The effect of Biopower application on shoot N content was most pronounced in ½N-PK and least in NPK applied plots. The four weeds planted with rice reduced rice grain yield by 12-75% in different soil amendments. Biopower application enhanced grain yield in rice, in weed free control, and in different weeds infested plots by 38-90% in ½N-PK, 6-13% in NPK and 12-150% in FYM applied plots. The present study has come to the conclusion that adverse effect of weeds on grain yield of rice can be managed by the application of Biopower in combination with either ½N-PK or FYM amendment.